05/11/20
通过以下最佳操作确保簇生成反应在patterned flow cells上成功进行
若在patterned flow cells上簇生成没有达到应有效率，可能会影响HiSeq测序仪器照相时对焦的错误，read1的信号强度低， 产生不寻常的%base曲线， 以及低的passing filter rate
• 在文库变性和进行ExAmp反应前，先完成cBot的清洗，确保cBot试剂板完全融化，之后将Flow Cell和manifold放到cBot上。
• 待EPX1，EPX2和EPX3试剂融化后，将每管分别上下颠倒5次，然后短离心使试剂集中到管底。一定不要震荡EPX试剂或其反应混合物。
• EPX试剂较为粘稠，吸取和打出请将速度放慢，以保证取量精确。
• 按照顺序混合EPX试剂（先加EPX1，次加EPX2，最后加EPX3），加好后将含有EPX试剂混合物的离心管放到实验室的rotator上室温旋转5分钟以保证试剂充分混匀。
• 立即将EPX混合物加到变性后的模板排管中，然后轻轻敲打排管外壁以去除管内的气泡。
• 立即开始cBot run。
更多与patterned flow cells上进行簇生成和测序相关的详细信息请参考下面链接：