Illumina 测序平台的最大读长

07/15/2022


Illumina平台和测序试剂盒支持多种 测序应用. 为了保证最高水平的测序质量,Illumina根据测序平台和SBS试剂盒版本支持最长特定的读长,请参阅“ 我所购买的SBS试剂盒最多能够满足多少个循环的测序? 技术文档。在本地运行管理软件( Local Run Manager,LRM)或仪器控制软件(Control Software)运行设置期间,可以选择更长的读长。但是当read长度超过支持的长度,Illumina将无法保证较高的数据质量。   

表 1. 测序平台和SBS试剂盒支持的最大读长

测序平台 SBS 试剂盒版本 最大读长
iSeq 100 v1 2 x 151bp
v2 2 x 151bp
MiniSeq MO* 2 x 151bp
HO* 2 x 151bp
MiSeq v2 2 x 251bp
v3 2 x 301bp
NextSeq 500/550 MO* 2 x 151bp
HO* 2 x 151bp
NextSeq 1000/2000 P1, P2 2 x 301bp
P3 2 x 151bp
HiSeq 1000/1500/2000/2500 HO* v3 2 x 101bp
HO* v4 2 x 126bp
RR** v4 2 x 251bp
HiSeq 3000/4000 N/A 2 x 151bp
HiSeq X N/A 2 x 151bp
NovaSeq 6000 SP 2 x 251bp
S1, S2, S4 2 x 151bp
NovaSeq X/X Plus 10B 2 x 151bp

* MO: 中通量 / HO: 高通量
** 快速试剂盒

Index Reads的最大读长

  • 仪器控制软件:如下表2所示,可在某些仪器的运行设置期间输入自定义Index读长:
  • LRM v2:Index读长最多可以设置100个字符(请参阅:“Local run Manager 2: 如何使用自定义文库制备试剂盒”技术文档)。
  • LRM v3:最多输入20个字符。如果需要20-100 bp读长,请选择手动上机模式。
  • 为确保Index Reads的测序质量,请勿超过Index支持的Reads长度。

表 2. 测序平台的最大单个Index长度

测序平台 单端或双端Index(最大读长)
iSeq 100 软件不限制
MiniSeq v1.X 20 bp
MiniSeq v2.X 20 bp
MiSeq < v4 软件不限制
MiSeq ≥ v4 100 bp**
NextSeq 500/550 v2 NCS 20 bp
NextSeq 500/550 v4 NCS 20 bp
NextSeq 1000/2000* 软件不限制
HiSeq 2500 软件不限制
HiSeq 3000/4000 软件不限制
HiSeq X 单端Index为 6 bp / 双端Index为 2 x 8 bp
NovaSeq 6000 < v1.6.0 20 bp
NovaSeq 6000 ≥ v1.6.0 软件不限制
NovaSeq X/X Plus v1.0 10 bp***
NovaSeq X/X Plus v1.1 本地设置运行为10bp***/云端设置运行为12bp***

*在云模式下设置运行时,Index长度限制在10 bp以内。
**对于20-100 bp之间的Index读长,请使用手动上机模式,因为LRM v3的Index读长限制在20 bp以内。
***在手动设置运行且不进行分析时,Index长度没有限制